小鼠原代毛囊干原代細胞
細胞培養操作:
收貨處理取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養
傳代代數可傳5代左右;3代以內狀態
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法:
1.吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4.待細胞貼壁后,培養觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養基。
商品屬性:
規格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | 貨號 | EY-XY3778 |
種屬來源 | 小鼠 | 組織來源 | 皮膚 |
生長特性 | 貼壁生長 | 形態特征 | 鋪路石狀細胞,不規則 |
形態:鋪路石狀細胞,不規則
培養基:小鼠毛囊干細胞wan全培養基
培養環境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
傳代特征:可傳5代左右;3代以內狀態最佳
細胞基本屬性:
種屬來源:小鼠
組織來源:皮膚皮膚
生長特性:貼壁生長
產品規格:5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:
產品貨期:5-6周左右
運輸方式:T25培養瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應限制:僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
背景介紹::毛囊作為一種重要的皮膚附屬器官,最為顯著的特點是始終處于生長期、退行期和休止期的周期性循環中。毛囊內外由上皮性毛根鞘和毛囊周圍鞘兩部分組成,兩者之間有玻璃膜。上皮性毛根鞘起源于表皮,
又分內根鞘和外根鞘。外根鞘相當于表皮的基底層和棘細胞層。在峽部末端外毛根鞘細胞增殖, 并且形成隆起,
成為毛發上段的標記。該隆突部位可環繞整個峽部末端或僅限于單側即立毛肌附著處,
目前被認為是毛囊干細胞存在的主要部位。研究表明,毛囊干細胞能分化成毛囊、皮脂腺、表皮,是皮膚組織工程理想的種子細胞。
原代細胞培養的主要步驟包括:
?一、剝離組織,去除外膜、結締組織等?:將組織從動物體中取出,并去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。
二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?:使用生理鹽水或其他適當的緩沖液洗滌組織,然后將其剪成約1mm大小的小塊。
三、?用0.1%~0.2%的消化?:將剪碎的組織塊加入含有0.1%~0.2%的緩沖液中,進行消化。消化時間可根據具體實驗需求選擇熱消化(37℃)或冷消化(4℃),熱消化時間短,冷消化時間長但條件更溫和。
?四、吹打分散后,過濾、計數?:將消化后的細胞吹打到一個離心管中,然后過濾、計數。
五、?按30萬/毫升分瓶培養?:將計數后的細胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養。
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